八十神非常嫉妒大国主神娶到美貌的八上姬，便想方设法地施行迫害。他们先是引诱大国主神去捕捉赤野猪，然后把烧红的石头从山上滚下，将大国主神活活烫死；第二次又引诱他进入一株开缝的枯树中，然后突然拔去支撑缝隙的楔子，把他活活夹死。大国主神两次死亡，都幸亏其亲生母亲请求神助，才两次得以救活。当八十神想第三次谋害时，早有提防的大国主神连夜逃亡，一直逃到了黄泉国。在这里，他遇见了须佐之男命的女儿，自己的祖奶奶须势理姬，两人情投意合结为夫妇。须佐之男命对此秽乱事件大为不满，他称大国主神为“苇原色许男”，意为“人界的粪便男”，并用种种狠毒的方法多次想杀死大国主神，但每次都由于女儿的帮助而使其险险逃脱。最后大国主神趁须佐之男命熟睡时，偷了老丈人的十拳剑、弓和天沼琴，带着祖奶奶兼妻子仓皇逃走。须佐之男命醒来后追赶不及，就在后面大喊道：“罢了罢了，我就成全你们吧！你用我的十拳剑和弓箭，去杀死你的那些异母兄弟，你就能成为统治苇原中国的大神了！但是，你必须以我的女儿为正室，你先前娶的八上姬只能做侧室。”经过一次又一次的艰险磨砺，大国主神已经脱胎换骨。他依照丈人的指点，狠下心肠，以神剑神弓伏击八十神，将八十个兄弟杀得干干净净。随后趁胜进击，与搭档少名彦神一起定出云、平越国、战北陆，最终彻底统一了苇原中国全境，成就大业，成为地上国的建国之神。
建国后，他依约让须势理姬做了正室。八上姬突然由正妻变成“二奶”，十分伤心，在生下御井神后就回了娘家因幡。