意大利经济上的发达和政治上的分裂，激起法国君主的贪欲，并为入侵提供了可乘之机。
1491年9月，法王查理八世率军越过阿尔卑斯山，侵入意大利。由北往南横扫意大利全境，次年2月占领那不勒斯王国，1495年5月查理加冕为那不勒斯国王。查理的胜利激起意大利各国的反对，于是阿拉冈国王斐迪南以西西里国王的名义联合教皇亚历山大六世、德国皇帝马克西米连一世以及威尼斯等，结成威尼斯同盟共同反对法国。1496年，那不勒斯在阿拉冈的援助下恢复了国家，法国的侵略果实化为乌有。路易十二继位后，采取外交手段拆散了威尼斯同盟。1499年，路易侵占了米兰。1500年，法国与西班牙共同瓜分了那不勒斯。1504年法国被西班牙赶出那不勒斯，又返回米兰，形成两个入侵国家南北对峙的局面。法兰西斯一世上台后，于1515年马林雅诺战役中打败瑞士，成为米兰公爵，从而切断德国和西班牙的联系。法兰西斯一世和查理五世在意大利进行了四次战争。1525年，双方在巴威亚爆发激战，结果法王被俘，法王以放弃米兰为代价才得以赎身。查理的胜利，使教皇克立门七世加入法国的反皇帝同盟。1527年5月，查理派兵攻入罗马。1529年缔结和约规定，法国放弃对意大利的主权要求。
1535年为处理米兰公爵继承权问题，双方又启战端，结果法国失败。法兰西斯一世之子亨利二世即位后，竭力支持德国诸侯反对皇帝，并取得凡尔登、麦茨、士尔三个主教区。1559年意大利战争结束，双方缔结和约。