书城教材教辅乳品微生物学实验技术
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第57章 附录Ⅵ 玻璃器皿及玻片洗涤法

1.玻片洗涤法

细菌染色的玻片,必须清洁无油,清洗方法如下:

(1)新购置的载玻片,先用2%盐酸浸泡数小时,冲去盐酸。再放浓洗液中浸泡过夜,用自来水冲净洗液,浸泡在蒸馏水中或擦干装盒备用。

(2)用过的载玻片,先用纸擦去石蜡油,再放入洗衣粉液中煮沸,稍冷后取出。逐个用清水洗净,放浓洗液中浸泡24h,控去洗液,用自来水冲洗。蒸馏水浸泡。

(3)用于鞭毛染色的玻片,经以上步骤清洗后,应选择表面光滑无伤痕者,浸泡在95%的乙醇中暂时存放,用时取出,用干净纱布擦去酒精,并经过火焰微热,使残余的酒精挥发,再用水滴检查,如水滴均散开,方可使用。

(4)洗净的玻片,最好及时使用,以免空气中飘浮的油污沾染,长期保存的干净玻片,用前应再次洗涤后方可使用。

(5)盖玻片使用前,可用洗衣粉或洗液浸泡,洗净后再用95%乙醇浸泡,擦干备用,用过的盖玻片也应及时洗净擦干保存。

2.玻璃器皿洗涤法

清洁的玻璃器皿是得到正确实验结果的重要条件之一,由于实验目的不同,对各种器皿的清洁程度的要求也不同。

(1)一般玻璃器皿(如锥形瓶、培养皿、试管等)可用毛刷及去污粉或肥皂洗去灰尘、油垢、无机盐类等物质,然后用自来水冲洗干净。少数实验要求高的器皿,可先在洗液中浸泡数十分钟,再用自来水冲洗。最后用蒸馏水洗2~3次。以水在内壁能均匀分布成一薄层而不出现水珠,为油垢除尽的标准。洗刷干净的玻璃器皿烘干备用。

(2)用过的器皿应立即洗刷,放置太久会增加洗刷的困难。染菌的玻璃器皿,应先经121℃高压蒸汽灭菌20~30min后取出,趁热倒出容器内之培养物,再用热肥皂水洗刷干净,用水冲洗。带菌的移液管和毛细吸管,应立即放入5%的石炭酸溶液中浸泡数小时,先灭菌,然后再用水冲洗,有些实验,还需要用蒸馏水进一步冲洗。

(3)新购置的玻璃器皿含有游离碱,一般先用2%盐酸或洗液浸泡数小时后,再用水冲洗干净,新的载玻片和盖玻片先浸入肥皂水(或2%盐酸)内1h,再用水洗净,以软布擦干后浸入滴有少量盐酸的95%乙醇中,保存备用。已用过的带有活菌的载玻片或盖玻片可先浸在5%石炭酸溶液中消毒,再用水冲洗干净,擦干后,浸入95%乙醇中保存备用。

3.洗液的配制

通常用的洗液是重铬酸钾(或重铬酸钠)的硫酸溶液,称为铬酸洗液。

成分:重铬酸钾60g,浓硫酸460mL,水300mL。

制法:重铬酸钾溶解在温水中,冷却后再徐徐加入浓硫酸(相对密度为1.84左右,可以用废硫酸),配制好的溶液呈红色,并有均匀的红色小结晶。

稀重铬酸钾溶液可如下配制:重铬酸钾60g,浓硫酸60mL,水1000mL。

铬酸洗液是一种强氧化剂,去污能力很强。常用它来洗去玻璃和瓷质器皿的有机物质,切不可用于洗涤金属器皿。铬酸洗液加热后,去污作用更强,一般可加热到45~50℃,稀铬酸洗液可煮沸,洗液可反复使用,直到溶液呈青褐色为止。