书城科普实验动物与动物实验方法学
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第11章 常用实验动物的特性、应用及饲养管理(三)

二、在生物医学中的应用

1.致热原等实验研究兔的体温变化灵敏,对细菌内毒素、化学药品、异种蛋白最易产生发热反应,发热反应典型、恒定,广泛用于制药工业及人、畜用生物制品等各类制剂的热原质检及发热解热机制研究。给兔注射细菌培养物和内毒素可引起感染性发热反应。给家兔皮下注射死的大肠杆菌或乙型副伤寒杆菌,几小时内即可引起发热,并可持续12h;给家兔静脉注射伤寒-副伤寒四联菌苗0.5~2.0ml/kg(菌苗含量不低于100亿/ml)注射后1~2h,直肠温度上升1~1.5℃并可持续3~4h。

给兔注射某些化学药品或异性蛋白等也可引起发热反应。皮下注射2%二硝基溶液(300mg)15~20min后开始发热,1~1.5h 达高峰,升高2~3℃;皮下注射松节油(0.4mg)后18~20h 引起发热,24~36h 达高峰,升高1.5~2℃;肌内注射10%蛋白酶1.0g/kg,可在2~3h 内引起发热,体温升高显著;皮下注射消毒脱脂牛奶3~5ml,通常3h后体温升高1~1.5℃。

2.微生物和免疫学研究兔对许多病毒和致病菌敏感,可以建立天花、脑炎、狂犬病、血吸虫、弓形虫等病的动物模型,用于研究人体相应的疾病。

兔血清产量多,可制备高效价和特异性强的免疫血清。腮淋巴结明显,适合注射,被广泛地用于人、畜各类抗血清和诊断血清的研制。病原体免疫血清,如细菌、病毒、立克次体等免疫血清。间接免疫血清,如兔抗人球蛋白免疫血清、兔抗羊球蛋白免疫血清。抗补体抗体血清,如兔抗豚鼠球蛋白免疫血清。抗组织免疫血清,如兔抗大鼠肝组织免疫血清、兔抗大鼠肝铁蛋白免疫血清。制备畜用兔化组织疫苗,如猪瘟兔化疫苗。

3.心血管病和肺心病的研究兔颈部神经血管和胸腔构造特殊,很适合做心血管实验,如直接法记录颈动脉血压、中心静脉压;间接法测量冠状动脉流量、心搏量、肺动脉和主动脉血流量,还可采用兔耳灌流和离体兔心等方法来研究药物对心血管的作用。此外,还可以用兔复制心血管病和肺心病及糖尿病的动物模型,如结扎家兔冠状动脉前降支可复制实验性心肌梗死模型;以重力牵拉阻断冠状动脉法复制家兔缺血性濒危心肌模型;通过选择阻断冠状动脉左室支位置的远近及牵拉重力的大小,可调整心肌梗死的范围及程度,也可复制心源性休克或缺血性心律紊乱模型;静脉注射乌头碱100~150mg、盐酸肾上腺素50~100ng/kg,可诱发家兔心律失常;静脉注射1%三氯化铁水溶液,每次0.5~4ml,每周2~6次,总剂量为25ml,注射完后45天可形成肺心病;小剂量三氯化铁(11ml)加0.1氯化铬生理盐水溶液雾化吸入,连续10次,雾化停止后10天可形成肺水肿。

兔对外源性胆固醇吸收率高达75%~90%,而大鼠仅为40%;对高脂血症清除能力较低,静脉注射胆固醇乳液后,引起的脂血症可持续72h,而大鼠仅为12h;造型时间短,一般3个月左右即可成型,而犬需14个月,鸡、猴有时可达一年以上。家兔形成的高脂血症、主动脉粥样硬化斑块、冠状动脉粥样硬化等病变与人类的病变极其相似。

4.生殖生理和避孕药研究兔属刺激性排卵动物,交配后10~12h排卵,雄兔的交配动作或注射绒毛膜促性腺激素80~100U均可诱发排卵,可准确检测排卵时间并容易取得胚胎材料,也可用于避孕药研究。性周期一般为8~15天,雌兔可表现为活跃、不安、跑跳踏足、抑制、少食及外阴稍有肿胀、潮红、有分泌物,持续3~4天,此时交配,极易受孕。但无效交配后,由于排卵后黄体形成,可出现假孕现象,产生乳腺,子宫增大等表现,经16~17天而终止。

5.眼科研究兔的眼球大,便于进行手术操作和观察,是眼科研究中最常用的动物。如在双眼角膜上复制等大、等深的创伤瘢痕模型,以左右对比观察药物疗效和治疗原理,可排除异体间的个体差异,还可在眼前房内移植卵巢皮质,观察药物对排卵的影响。

6.皮肤反应实验兔对刺激反应敏感,反应近似于人,常选用家兔皮肤进行毒物对皮肤局部作用的研究、兔耳可进行实验性芥子气皮肤损伤和冻伤以及烫伤的研究;化妆品对皮肤影响的研究;各种人用和畜用生物制品中的毒素、类毒素等皮肤反应试验。

7.遗传性疾病和生理代谢失常的研究如进行软骨发育不全、低淀粉酶血症、维生素A缺乏、动脉硬化等研究,同时也广泛应用于研究药物的致畸作用或其他干扰正常生殖过程的现象。

8.其他方面进行各种寄生虫病的研究、畸形学的研究,进行各种人用和畜用生物制品中的毒素、类毒素和病毒等皮肤反应试验,以及制品的效价试验、安全试验,进行化学工业上的急性和慢性毒性试验等。在实验生理学方面的应用,在中等教育与高等教育教学生理学课程中多采用家兔作为实习动物。可用做生物制品的原材料,如用以生产猪瘟兔化弱毒疫苗。

三、饲养管理

兔的饲养管理,是兔繁殖、育种、营养、饲料等知识的综合利用。饲养管理对家兔的繁殖生产及其仔兔的生长发育极为重要。一个养兔单位即使有品质优良的种兔、优越的环境条件及良好的饲料配方,如果饲养管理失误,不仅会使良种退化,而且也必然会引起各种疾病的发生和流行,造成严重损失。供实验的家兔,因饲养管理不当而导致实验失败的例子不胜枚举,为保证家兔繁育和实验工作的安全运行,应进行科学的饲养管理。

为达到兔的标准化饲养,应采用全价颗粒饲料。繁殖兔、育成兔和各种实验兔的饲料配方应符合规定的标准并保持相对稳定。对哺乳的母兔、孕兔以及刚离乳后的育成兔应保证足够的营养需要,对种雄兔、后备种兔和实验待用兔应适当限制能量标准,防止脂肪沉积造成过肥,各种兔均应经常供给足够的清洁饮水。

实验兔的生产目的与各种经济兔的生产不同。前者对外界环境条件的敏感性强、适应性差,并且要求背景资料齐全。所以在繁育生产和试验研究过程中,不仅要按着兔群的遗传学和微生物学控制的等级要求提供相应的环境条件,还必须实行科学的程序化管理。

(一)兔的繁育

1.配种兔性成熟的早晚,取决于品种、性别、营养以及各种环境因素的影响。一般来说,兔的初配月龄,大型品种为7~8个月,中型品种为6~7个月,小型品种为5~6个月。雌兔在1个月里可发情2~3次,发情周期为8~15天,发情持续期为3~5天,个别的可能长达5天以上,在此期间配种较为顺利。雌兔发情后,举动不安,食欲下降,开始时,外阴黏膜呈潮红色,到发情旺盛时,变成老红色,发情后期则又变成紫红色。当其外阴部呈老红色时进行交配则受孕率最高。兔的交配方法有如下几种。

(1)自然交配法就是把雄、雌兔混养在一起自由交配。这种方法简单及时,并能防止漏配和节省人力,但缺点较多。雄兔整天追逐雌兔交配,体力消耗过大,精液品质低劣,受孕率与产仔率低,且易衰老,所生仔兔体质差,抗病力低。容易传染疫病,影响兔群安全。因此这种配种方式现在一般很少使用。

(2)人工辅助交配法雌雄分笼饲养管理条件下,在雌兔发情期间,人为地把发情雌兔放入雄兔笼内进行交配。方法是:在雌雄兔配种之前,首先检查其健康状况和发情表现,若雌兔发情良好,正值交配时机,可按配种计划,把雌兔放入雄兔笼内配种。交配后,再经1~2min,即可把雌兔送回原笼,并将雌雄兔耳号及交配日期等详细登记在配种卡上。为了提高雌兔的受孕率和产仔率,在雌兔配种之后隔10~12h再复配一次。每批配种应在3天内交配完毕,这样可保证同批仔兔日龄不超过1周。频密繁殖法,在产后3~4天内交配。半频密繁殖在产后2~3周再次交配。每只兔交配后立即登记。

(3)人工授精人工授精是兔繁殖改良最经济、最科学的方法。它可提高优良种雄兔的配种效率,保证精液的质量,提高受孕率和产仔率,杜绝生殖器官疾病的传播,便于开展科学研究。

具体方法是:用假阴道采取品质精良的雄兔的精液,经显微镜检查,若精子活动好,密度大,可用7%的葡萄糖稀释液做2~3倍稀释,然后用一截15cm长的人用导尿管,经灭菌消毒和稀释液冲洗后,吸取稀释好的精液,将导尿管插入发情雌兔的阴道内4~5cm处,慢慢将精液注入阴道底部子宫颈口附近即可。为了保证雌兔的受胎效果,在人工授精之前4~6h内可在耳静脉注射促性腺激素,刺激雌兔排卵。在人工授精的操作过程中,要注意严格消毒,无菌操作。

2.妊娠诊断兔的妊娠期平均为30天,个别也有28天或35天者。在雌兔交配后10~12天采用摸胎法进行诊断,方法是在配种或输精后10天左右,抱住雌兔,一手伸入雌兔腹下,手心朝上,手指合拢,在雌兔的小腹处探摸胎仔。怀孕8~10天时的胎仔犹如蚕豆大小的扁圆肉球,具有弹性和光滑感。注意要与结肠内粪球相区分,粪球呈硬而缺乏弹性的圆粒状手感。怀孕兔在记录表上填入预产期,空怀的再编入下一批进行交配。

3.分娩按预产期提前2~3天(即交配后27~28天)准备好产箱放入笼内,放入产箱后每天检查一次,分娩过程大致可分为2个阶段,即分娩前的准备阶段、胎仔和胎衣排出阶段。第一阶段主要变化为子宫肌层开始收缩,子宫颈扩大。此时雌兔表现为阵痛,精神不安,四爪刨地、顿足、弓背,并排出胎水。第二阶段即胎仔和胎衣排出阶段,子宫颈已完全张开,因此使胎仔容易通过,这时子宫收缩的强度和次数都大大增加,最后将胎仔挤出子宫外,此时雌兔边产出,边将仔兔脐带咬断,并将胎衣吃掉,同时,舐干仔兔身上的血迹和黏液,然后跳出巢窝找水喝。这时要满足雌兔的饮水,否则雌兔常常会吃掉仔兔。雌兔分娩产仔的时间较短,一般产完一窝仔兔只需20~30min。但也有个别雌兔,产下一批仔兔后,间隔数小时或数十小时,才产第二批仔兔。产后应立即记录产仔日期、产仔数。如有特殊需要再记录初生体重,并按产仔多少在同批产仔雌兔间调剂代乳,寄养的仔兔需做好标志并记录。

4.哺乳雌兔自分娩到仔兔离乳,这段时间称为哺乳期,需40~45天。哺乳期雌兔每天分泌的乳汁,可达100ml左右,在泌乳高峰期甚至有达200ml者。雌兔不但产奶量高,且乳质浓度也高。兔乳含蛋白10.4%,脂肪12.2%,乳糖1.8%,灰分2.0%,干物质26.4%,是牛奶和山羊奶的2倍多。因此,哺乳期必须注意加强哺乳雌兔和仔兔的饲养管理。

5.测重一般仔兔在21日龄开始采食饲料,育种学常把21日龄的仔兔窝重作为衡量母兔泌乳性强弱的指标。

6.离乳离乳时间取决于交配方法,以及兔的型号。一般采用半频密繁殖较多,仔兔在6周龄或45日龄离乳;频密繁殖时,仔兔是在28日龄离乳。小型仔兔40~50日龄离乳,体重达500~600g;大型仔兔40~45日龄离乳,体重达1.0~1.2kg。恰当的离乳时间,应是雌兔的泌乳量已显著下降,而仔兔已能很好地采食固体饲料的时候,但也有人认为,仔兔28~30天离乳是有利的,可以提高雌兔的繁殖率,且有利于仔兔生长。据认为离乳后仔兔有机会充分摄取食物。离乳时每只仔兔均按统一编码打上耳号和产期、同窝仔数、体重、21日龄窝重以及父、母号等项一并记入仔兔登记表内。离体方法有2种:一种是一次性断乳,即全窝仔兔与雌兔一次分开;另一种方法是分批断奶,即在断奶时将发育良好的仔兔首先与雌兔隔离,留下发育差的仔兔再哺乳一段时间后再第2次,第3次断奶。但不论哪一种断奶方法,都应遵守将雌兔取走,将断奶仔兔留在原笼饲养的原则,这样可以显著地减少仔兔因断奶而发生的应激反应。

(二)兔的饲养设施

1.饲养环境兔的饲养环境是指饲养兔所具备的一切物质条件,就是指影响兔生长发育和生理生化平衡的一切外界条件及因素。

(1)温度温度是兔饲养中最敏感的条件之一。外界环境过高或过低的温度,均对兔的饲养产生不良影响。一般来讲,兔舍温度应维持在16~26℃之间。当外界温度达30℃以上时,兔即表现体温升高,食欲下降,生长发育停滞;怀孕雌兔体重下降;新生仔兔生活力低,体重不足,死亡率可达90%~100%;雌兔可出现濒死前的流涎或神经症状。与高温相比较,兔虽能抵抗较低温度的变化,但对实验兔来讲,过低的温度环境同时会不同程度地影响其正常的生长发育及各项生理指标。因此,在建造试验兔舍时,要充分注意兔舍的保温与隔热问题,既要具备冬天保暖,又要能够夏天防暑降温。

(2)通风换气兔舍通风换气的目的,主要是引进舍外新鲜空气,排除舍内污浊气体,有利于降低舍内各类微生物的孳生,减少有害气体及传染病发生的来源。兔舍内的通风换气可通过门窗自然通风、机械通风等各种方法进行。兔舍的通风换气要均匀,不留死角,防止形成“贼风”进入兔舍。兔舍的换气量控制在每只3.2m2/h较为理想。

(3)湿度潮湿的环境是影响兔生长发育的一个重要因素。兔长期处在潮湿的环境中,机体的抵抗力降低,发病率增加,病情加剧。潮湿的环境,易促使病原微生物的孽生,使兔易患疥癣、湿疹等皮肤病。此外,潮湿的环境中,很容易使饲料变霉,使兔群暴发真菌病,引起中毒。兔舍内的适宜湿度为50%~65%。

(4)噪声兔胆小怕惊,常常在噪声下发生惊厥、痉挛。当兔受到过度噪声刺激时,脉搏、呼吸次数增加,血压上升,唾液分泌改变,胃收缩受抑制,胃液酸性降低,血糖升高。淋巴细胞与嗜酸粒细胞的比值降低,血液中肾上腺素的含量增加。由于噪声刺激在生理上表现出明显影响,因而对兔的生长发育及繁殖均带来不良后果,兔对疾病的感受性明显提高,感染率和发病率大大增加。一般认为,噪声对机体的危害是在85~95dB之间。兔舍的噪声应控制在60dB以下。

2.饲养用具

(1)兔笼目前一般为镀锌铁丝或不锈钢丝做成,笼底最好用竹片或木条,笼底间距以1cm为宜。笼底板要求兔粪易于掉下,兔行走方便。竹片或木条制定方向应与笼门垂直,以防止兔脚形成外向。笼底板要求能自由推进,便于清洗消毒。通常笼宽为兔体长的18~20倍,笼深为体长的1.3~1.5倍,笼高为体长的1.2倍。

兔笼的放置一般有2种方式:即层叠式和阶梯式。层叠式是每层上下对齐,上下层之间有一盛粪板。盛粪板一般用塑料或玻璃钢瓦制成,有斜坡式和凹式2种。其中凹式多用,供水条件好,可供水冲洗粪便,然后粪便顺粪槽流进蓄粪池。阶梯式是将兔笼排列在阶梯形的笼架上,上一层兔笼与下一层兔笼要缩进一个兔笼的深度,各层之间无须设置盛粪板,粪尿直接落到地面的粪沟中,兔笼在兔舍内一般采用背靠背排列,这样有利于合理使用室内面积,比较经济。

(2)产箱产箱是给雌兔做巢产仔的设备,一般用木料、金属板等材料制成,木制产箱边缘要包上金属,以防啃咬,箱底要粗糙,有缝隙,以便粪便流出。产箱前方要有月牙形缺口。便于仔兔爬出爬进,产箱的大小一般以能容纳雌兔和一窝仔兔为宜。

(3)食槽一般采用簸箕式食槽,用一轴固定在兔笼上,可转动或自由取下。要求饲料既能被兔顺利采吃,又不致被扒拉打翻和污染,食槽最好用金属片制作,也可用陶制或瓷制食盆,它虽易于清洗,但较为笨重,且易被打翻或被粪便污染。

(4)饮水器目前常用的有乳头式饮水器、陶制瓷碗、倒置玻璃瓶等几种方式。对于作为实验动物的兔,最好用倒置玻璃瓶饮水方式,此种方法简单易行,清洁卫生,安全可靠。

(三)饲育人员管理技术及每天工作程序

1.管理技术

(1)捕捉方法兔的耳部是软骨,不能承悬全身重量,如强行捉提,很容易造成耳根受伤,也不能倒拉后腿,以免引起脑充血。正确的抓法是用右手大把连耳根抓住颈后宽皮,轻轻提捉,然后左手托住兔臀部,使其重量倾向左手,这样既不伤害兔体,也防止兔抓伤人。

(2)年龄鉴别在没有记录的情况下,兔年龄可以从趾爪的颜色、长相以及牙齿生长情况、皮板厚薄等三方面来识别。白色兔的年龄可根据后脚趾爪的颜色来识别:一般趾爪的颜色是基部呈粉红色,尖端呈白色,1岁以下红色多于白色,1岁的兔红色与白色长度相等。有色兔的年龄可根据趾爪的长度及弯曲度来识别:青年兔趾爪较短而平直,隐藏在脚趾之中,随年龄的增长,趾爪逐渐露出脚毛之外,老年兔则有一半趾爪露出脚毛之外,而且爪尖钩曲。另外,一般青年兔的门齿洁白,短小而整齐,皮板薄而紧密,老年兔的门齿黄褐色,厚而长,时有破损,皮板厚而松弛。

(3)性别鉴别初生仔兔可观察其阴部孔洞形状和距离肛门的远近:孔洞扁形,大小与肛门相同,距离肛门较近者为雌兔;孔洞圆形而略小于肛门,距离肛门较远者为雄兔。开眼后的小兔可检查外生殖器。将食、中指夹住尾巴、大拇指轻轻向下按压生殖器,顶端呈圆形,下为圆柱体者为雄兔;顶端前联合圆、后联合尖者为雌兔。中成年兔只要看有无阴囊,便可鉴别。

2.工作程序工作人员每天早晨和下午上班后首先检查水、电、取暖、换气等设施的运转情况,并在登记表上记录室温、湿度等,如有故障或超出规定范围应立即报告,采取措施;晚上下班前应再按上班时的次序检查一次,并做记录,关好门窗、水、电方可离开工作室。

对所管的兔群进行查看。如有开门跑兔,应立即捉拿对号放回原笼,并做记录备查是否有异性兔外遇;检查产箱,登记产仔情况。

喂料、添水,如系自动饮水要同时检查水嘴有无堵塞或漏水;冲洗粪板、打扫卫生。

按繁育工作日程表进行仔兔测重、离乳打号,为避开周日产仔常在周一至周三安排配种,妊娠诊断,清洗、消毒笼具和产箱等;按繁殖登记表、仔兔登记表和环境控制记录表所记载的内容进行整理资料、编写工作日程,处理日常工作、请领饲料和用品等。

3.饲养设施的卫生管理环境控制设施应定期请有关人员进行维修、保养以便确保正常进行。①食盒、水具应定期清洗、消毒。②饲养室和全部用具每年要彻底消毒2次。③清洗、消毒过的用具和设施应与用过的、污染的分别存放。

(四)兔的分群和运输

家兔在饲养室内转群或购买实验用兔,必须注意到安全运输合理分群,避免造成意外的伤害。①应按所运兔的微生物控制级别采用相应的专用笼具;运输笼具在用前、用后按规定进行消毒灭菌。②按兔的级别和性别等分别装笼,成年雄兔在一起应防止打斗咬伤。③笼具要处理好避免造成兔外逃或外伤。④长时间运输后应控制饮食、避免饥饿后暴饮、暴食,否则会引起消化不良而导致胃肠疾病。

第六节 犬的生物学特性、应用及饲养管理

犬(Canis familiaris)在生物学分类上属于哺乳纲(Mammalia),食肉目(Carnivora),犬科(Canis familiaris),犬属(Canis),犬种(Canis familiaris lineaus)的动物。作为家畜,犬的历史最长。作为实验动物,从本世纪40年代开始。1950年美国推荐小猎兔犬(Beagle)作为实验用犬,适用于生物医学各个学科的研究,并为世界各国所公认。犬染色体数2n=78.

一、生物学特性

(一)一般特性

1.生活习性犬喜近人,易驯养,经短期训练可服从人的意志和领会简单意图,能很好地配合实验。犬喜欢主人轻轻拍打、抚摸其头颈部,但臀、尾部忌摸。犬有很强的适应能力,犬可承受比较热和冷的气温,但其变化不能太剧烈,否则易生病。健康犬的鼻镜滋润有油状,触之有凉感,反之则提示即将发病或已经发病。成年雄犬好斗,并有合群欺弱的特点,归家性很强,能从很远处凭去时所排少许尿而留下的气味嗅着自行归家,其撒尿也是划分领地的行为。冬天喜晒太阳,夏天爱洗澡。犬习惯不停的走动,故要求其饲养场内有一定的活动范围。

2.食性犬习惯于啃咬骨头与喜吃肉类和脂肪性饲料。经家畜化后也可杂食或素食。犬由于咀嚼不完全,对蔬菜的消化能力差,故烹调犬食时应将蔬菜切碎,否则会整个地排出。

3.性情犬性情凶猛,不合理饲养及虐待,可使之恢复野性,甚至主动攻击人。

4.寿命犬的寿命一般在10~20年。

(二)解剖学特点

1.齿犬出生后约20天开始生乳齿,2个月以后逐渐由门齿、犬齿、臼齿换为恒齿,8~10个月恒齿换齐。乳齿齿式为2(I3/3,C1/1,P3/3,M0/0)=28.成年犬齿式为2(I3/3,C1/1,P4/4,M2/3)=42.齿呈食肉动物的特点,善于咬、撕,臼齿能切断食物,但咀嚼较粗。

2.骨骼犬无锁骨,肩胛由骨骼肌连接躯体,阴茎骨存在是其特征之一。头骨连着7个颈椎,13个胸椎,9对真肋,4对假肋和一根胸骨;7个腰椎;3个骶椎融合成为一块骶骨;尾椎骨8~22个形成骨骼的主轴。后肢由股关节连接骨盆。

3.视觉眼晶状体较大,但视力很差,每只眼有单独视力,正面景物看不清,对移动物体感觉灵敏,犬的视网膜上没有黄斑,即没有最清楚的视觉点,视力仅为20~30m。犬为红绿色盲,故不能以红绿色作为条件刺激来进行条件反射实验。

4.嗅觉和听觉犬的嗅脑、嗅觉器官、嗅神经极为发达。鼻较长,鼻黏膜上布满嗅神经,能够嗅出稀释0.1mg/L的有机酸,特别是对动物脂肪酸更为敏感,犬的嗅觉能力较人的强100倍左右。犬的听觉极为灵敏,超过人的听觉,可听到3.5×104Hz。

5.消化系统犬的食管全部由横纹肌构成。胃较小,容易做胃导管手术。肠道短,约为体长的3倍,肠壁厚薄与人相似。肝脏较大,胰腺小且分左右2叶,于十二指肠降部各有一胰腺管开口处,因犬胰腺是分离的,易摘除。脾脏是最大的储血器官。

6.循环系统具有发达的血液循环,心脏较大,占体重的0.72%~0.96%。内脏与人相似,比例也近似。

7.泌尿系统犬的肾比较大,两肾位置高低不一,左肾位置比右肾低。

8.汗腺犬的皮肤汗腺极不发达,趾垫有少许汗腺。散热主要靠增速呼吸频率,舌头伸出口外做喘式呼吸,加速散热,故舌头在体温调节中起重要作用。

9.生殖系统雄犬无精囊和尿道球腺,附睾很大,前列腺极发达,有特殊的阴茎骨。雌犬为双角子宫,乳头4~5对。

(三)生理学特点

1.犬属于春秋季单发情动物性成熟280~400日龄,发情期7~13天,发情后1~2天排卵。性周期180(126~240)天,妊娠期60(58~63)天,每胎产仔2~8只,哺乳期60天。适合配种年龄:雄犬为1.5~2岁,雌犬1~1.5岁。

2.犬有5种血型即A、B、C、D、E型,只有A型血(具有A抗原)能引起输血反应,其他4型血Ag性弱,可任意供各型血的犬受血,包括A型血在内可以进行交叉输血,无输血反应。仅有凝集作用,而无溶血作用。

3.犬可分为4种神经类型

(1)多血质(活泼的)——均衡的灵活型。

(2)黏液质(安静的)——均衡的迟钝型。

(3)胆汁质(不可抑制的)——不均衡兴奋占优势的兴奋型。

(4)忧郁质(衰弱的)——兴奋和抑制均不发达的类型。

这对一些慢性实验,特别是高级神经活动的实验很重要。

4.一般生理值体温38.8℃。心率80(66~130)次/min。血压13.3/20kPa(100/148mmHg)。呼吸频率20(10~30)次/min。染色体39对。唾液中缺乏淀粉酶。血液指标:血红蛋白148(110~180)g/L,血细胞比容0.46(0.38~0.53),红细胞数6.3(4.5~8.0)×1012/L,白细胞数9(6~13)×109/L。中型犬的胃容量约为2500ml,食料量为226.9(300~500)g/d,饮水量为350ml/d,排粪量为113~340g/d,排尿量为65~400ml/d。

(四)主要品系、种群

国际上用于医学研究的犬主要有下述几种。

1.比格犬又称小猎兔犬,原产英国,是猎犬中较小的一种,1880年引入美国,开始大量繁殖。属小型犬(成年体重7~10kg,体长为30~40cm),短毛,温驯易捕,亲近人,对环境适应力强,抗病力强,性成熟早,产仔多。被公认为是较理想的实验用家犬,已成为目前实验研究型别中最标准的动物,此种犬多用于长期的慢性实验。在国外,它已被广泛用于生物化学、微生物学、病理学、病毒学、药理学以及肿瘤学(如癌的病因学和癌的治疗学等)等基础医学的研究工作中,而农药的各种安全性试验,特别是制药工业中的各种实验,使用该犬最多。

2.四系杂交犬由Greyhound、Samoyed、Besenji、Labrador四品系动物杂交而成,是一种专门适用于外科手术的犬,具有体形大,心脏大,耐劳,不爱吠叫等优点。

3.纽芬兰犬专用于实验外科。性情温驯,体形大。

4.墨西哥无毛犬可用于研究黑头粉刺病。

5.Boxer犬可用于淋巴肉瘤,红斑狼疮病的研究。

6.Dalmation犬一种黑白花斑点的短毛犬。可作为特殊的嘌呤代谢动物模型。

我国繁殖饲养犬品种繁多,主要有华北犬,耳朵小,后肢较小,颈部较长。西北犬,形态上正好和华北犬相反。2种犬各部体表面积的百分比有一定差异,都适合做烧伤、放射损伤等研究。最著名的为藏獒、中国松狮犬、中国沙皮犬、北京狮子犬四大名犬。经过人工定向选育出来的品种,如狼犬、哈巴犬、藏袖犬、猎犬。四川松潘犬及一般农家饲养的土种犬现多作为实验用犬。

二、在生物医学中的应用

1.实验外科学犬的应用主要在实验外科方面。临床医生在研究新的手术或麻醉方法时往往选用犬来做动物实验,通过实验取得经验和技巧后用于临床,如心血管外科,脑外科,断肢再植,器官和组织移植等。

2.基础医学研究犬是目前基础医学研究和教学中最常用动物之一,尤其是生理学和病理生理学的研究。犬的神经、血液循环系统发达,适合做失血性休克、弥漫性血管内凝血、脂质在动脉中的沉积、急性心肌梗死、心律失常、急性肺动脉高血压、肾性高血压和脊髓传导实验及大脑皮层定位实验、条件反射实验、内分泌腺摘除实验,各种消化道和消化腺瘘管等实验研究。

3.药理学、毒理学实验常用于药物临床前的各种药理实验研究,如药理实验、药物代谢实验、毒性实验等。

4.非传染性疾病研究如蛋白质营养不良、高胆固醇血症、动脉粥样硬化、糖原缺乏综合征、先天性白内障、遗传性耳聋、血友病、先天性心脏病、先天性淋巴水肿、家族性骨质疏松、视网膜发育不全、黑头粉刺病、淋巴肉瘤、红斑狼疮病、周期性中性白细胞减少症,软骨发育不全、胱氨酸尿症、肾盂肾炎、青光眼等疾病的研究。

5.传染病学研究如利用犬制作病毒性肝炎、狂犬病等动物模型,细菌性疾病如链球菌性心内膜炎、牛型或人型菌株所致结核病、霍乱的动物模型。寄生虫病如犬恶丝虫病、十二指肠钩虫病、日本血吸虫病、华支睾吸虫病等动物模型。

6.肿瘤学研究如雌犬乳房混合型肿瘤、皮肤的基底细胞和腺体肿瘤、黑色素瘤及骨肉瘤、白血病、扁桃体癌、肠淋巴肉瘤、睾丸肿瘤、雌性纤维平滑肌瘤、甲状腺肿瘤等动物模型。

7.行为学以及精神病研究将犬隔离饲养的办法,建立隔离与抑郁症的模型。其他,如神经官能症、狂躁抑郁型精神病等动物模型,条件反射动物模型。

8.老年学研究犬可作为老年和老化机制研究的实验动物,如骨骼老化、关节炎、造血系统老化、慢性肾炎和肿瘤。犬易发老年性痴呆的神经炎斑,犬也是老年性白内障、老年性耳聋的常用模型。

9.慢性实验研究由于犬可以通过短期训练很好地配合实验,所以非常适合于进行慢性实验。如条件反射实验、各种实验治疗效果实验、毒理学实验、内分泌腺摘除实验等。犬的消化系统发达,与人有相同的消化过程,所以特别适合于做消化系统的慢性实验。如可用无菌手术方法做成唾液腺瘘、食管瘘、肠瘘、胰液管瘘、胃瘘、胆囊瘘等来观察胃肠运动和消化吸收、分泌等变化。

三、饲养管理

(一)性别鉴定

犬的性别鉴定很容易,只需要观察暴露在体表的生殖器官就可分辨雌雄,雄犬有睾丸和阴茎,雌犬有乳头和阴道。

(二)配种

根据体形、毛色选择健康、发育良好的犬作为种犬。按雄:雌=1:(4~6)的比例留种。雄犬的年龄为1.5~2年,雌犬年龄为1~1.5年(第2次发情以后)可以交配。种犬需经过调教。建立终身记录卡(来源,父母,体重,出生年月,性别,名字号码,繁殖交配记录,健康记录等)。一般1雄与2~3雌同场饲养。在雌犬发情季节,雄犬需单笼饲养。

犬出生后280~400天可以发情,多数在每年春秋单次发情。雌犬发情期可分为:发情前期和发情期。发情前期外阴红肿,并有血液同黏液排出,开始不安,阴道涂片有多量红、白细胞和有核上皮细胞。此期为7~9天,进入发情期。此期年龄较大的犬开始不太明显,因此要避免忽略而错过交配日期。发情期外阴红肿,排出血性分泌物,颜色明显变淡,呈现不安,爬跨其他雌犬。当雄犬爬跨交配时,雌犬主动下塌腰部,尾巴歪向一侧接受交配。此期可持续6~10天。阴道涂片可见红细胞明显减少,无核角质化上皮细胞增加。排卵一般在发情期开始1~2天内。

在发情前期,见血性分泌物开始9~12天(也就是发情期第2~4天),将雌犬和雄犬牵入交配场地(无其他犬的场地),让其自然交配,一般并不困难。如第1次交配的雌犬,最好用项链牵着,协助固定,以便交配顺利完成。一般交配一次即可受孕,但为了提高受孕机会,隔日或次日再配一次。犬虽在发情期1~2天排卵,但卵第一极体在排卵时尚未排出(这是很特别的,卵在此时尚未成熟),所以要数日后脱去极体,才能受精。这也是选择在第2~4天交配的原因。

(三)妊娠

犬的妊娠期平均为62天,范围为58~64天。初次交配的雌犬,妊娠15~20天后,胸部乳头红胀。妊娠40天称为重孕犬,腹部渐大、食欲增加、不好动,要安静,少给外人参观。50天后进产房,备好产床、产箱,使之适应。

(四)分娩

妊娠50天起,每天要仔细观察。分娩当天外阴和乳房肿胀,食欲明显减少或拒食。分娩后咬断脐带,舔去仔犬身上的黏液。产仔8只以上时,雌犬消耗体力太多,有的仔犬身上黏液不能舔净而窒息或冻僵致死。此时,应有人协助分娩,产程为4~12h。

(五)哺乳

新生仔犬能自行吮奶。雌犬乳头8~10个,哺乳能力有限,大型犬可哺10只仔犬,超过此数则可考虑寄养或人工哺乳。如雌犬哺乳能力强,也可全部由雌犬哺乳。仔犬出生后25天可训练其自食软饲料。30日龄时,仔犬须驱肠道寄生虫(主要是蛔虫),50~60天离乳。

(六)饲养

1.饲养环境犬吠声大,需单独养在一个独立区域,为了排除犬吠声对周围环境的干扰,在不影响实验的情况下可采用破坏声带手术来减低犬吠声。室内饲养应注意隔音设备。饲养方式可采用散养和笼养。生产群、待用犬可散养,需要向阳、有运动场的房舍,一般每舍不超过10只。仔犬和实验用犬可笼养。

犬喜动,应定期让犬活动,以促进新陈代谢,增强抵抗力,运动时可晒太阳促进犬体内合成维生素D,帮助钙、磷的吸收。同时可进行适当调教,以便给实验和饲养人员工作方便。

2.饲喂与营养犬是肉食性动物,但是长期与人类共同生活中,逐渐习惯于杂食。犬的饲料多样,可用颗粒饲料,也可喂煮熟的米饭、窝窝头等,应注意全价营养,喂食量按体重计算,颗粒料按体重的4%供给,成年犬每日分2次喂饲,幼犬可每日3次。保证供给充足的饮水,自由饮用。

(七)管理

1.清洁卫生保持环境卫生清洁,注意冬天保暖夏天防暑。每天打扫粪便,进行地面冲洗,洗刷食盒和饮水盆。经常刷、梳犬毛,除去浮毛和污物,夏天可给犬洗澡。要经常性地检虫和驱虫。

2.检疫做好隔离检疫工作,新购入犬需有检疫和注射狂犬疫苗证明,隔离饲养21~26天,此期间做临床观察和血液检查、驱虫等工作,对没有注射狂犬疫苗的要进行补注射。

3.管理应注意编耳号,建立档案卡,保健卡,计划繁殖,专人专职护理等。

第七节 猫的生物学特性、应用及饲养管理

猫(Felis domestic)在生物学分类上属于哺乳纲(Mammalia),食肉目(Carnivora),猫科(Felidae),猫属动物。染色体2n=38.猫和人类在一起已生活了很长时间,其祖先及演化史尚难下定论。猫自19世纪末开始用于动物实验。为提高实验用猫的质量,近年来,不少国家开始进行专门的饲养繁殖。有的国家已进行纯化和培育出了无菌猫、SPF 猫。我国也有一些单位进行了专门饲养,开展了品种固定工作。

一、生物学特性

(一)一般特性

1.性情与行为猫性情急躁,本性凶恶,感适宜时善叫,遇到威胁时弓背。猫一般喜爱孤独而自由的生活,除发情和交尾外,很少三五成群在一起栖息。这给繁殖和饲养带来一定的困难。猫的典型行为特点为聪明,性格孤独、自私而且易嫉妒,行动敏捷,善跳跃。正常情况下,经调教对人有亲切感,非常温驯。猫生性谨慎,对周围环境的变化特别敏感,对于陌生人或环境十分多疑,因而在环境改变的情况下,应使猫适应后,在进行实验。

2.饲养环境猫喜爱舒适、明亮、干燥的环境,白天不愿躲在阴暗的角落,舍内开放饲养的猫,常卧在有阳光的阳台或窗台上。猫爱清洁,讲卫生,一般不随地大小便,有在固定地点大、小便的习惯,便后立即掩埋。对笼养猫,在饲养笼的一角,放置盛有铺垫物(沙土、锯末、碎吸水纸等)的便盆,即可收集猫的全部大、小便。

3.梳理被毛猫总是在吃食后或玩耍后,以及运动后或睡醒后开始梳理被毛。舌头舔被毛,刺激了皮肤毛囊中皮脂腺的分泌,使毛发润滑有光泽,不易被水打湿,并能舔食到少量的维生素D,促进骨骼的正常发育。运动后,猫体内产生的热量需要散出,用舌头将唾液涂到皮毛上,利用唾液中的水分蒸发而散热,是一种调节体温的方法,可以降温解暑。同时,还能促进毛发新生,去除体表寄生虫,有利于健康。

4.习性猫很怕水,身上不让有一点水,它决不会自动到水里游泳,但猫爱洗澡。猫最喜欢人用手轻挠它的下颌,不论怎样生疏或不驯良的猫,轻挠它的下颌,它就会俯首驯服,但是,猫很害怕挠它的尾根,如果挠尾根,会立即逃走,或者用爪子反扑。

5.睡眠猫一天中有半天处于睡觉状态,猫在一天中有14~15h在睡眠中度过,还有的猫要睡20h以上,所以猫就被称为“懒猫”。但是,猫不像人那样集中的睡,而是分成数次睡,所以,猫在夜里任何时候都可以起来。研究表明,猫的睡眠中有3/4是假睡,即是打盹儿。所以,看上去一天十几个小时猫都在睡觉,其实熟睡的时间只有4h。

6.猫善于爬树,不善于下落虽然猫运动神经发达,善于爬高,但却不善于从顶点下落。能上,不能下。经常是一边心惊地往后仰,一边哆嗦地往下爬,如果到地面的距离短,就往下跳,如果高,它会发抖,就像所谓的恐高症。

7.猫的胡须猫的嘴的两侧、眼、脸颊、下巴等四处长着胡须。胡须根部布满神经,轻微的动静都能察觉,而且连气流、风向都知道。猫几乎不会猛地撞上什么东西或者东张西望时会踩空,猫的胡子是把尺子。

8.成年猫每年在春夏和秋冬交替的季节要各换一次毛,以适应气候的变化。猫最适宜的温度为20(18~21)℃,相对湿度为50%左右。

9.猫属于肉食性动物猫利用发达而尖锐且能伸缩的爪捕食其他动物,常窥视和迅速捕捉鼠类、鸟类、爬行类、鱼类、昆虫类动物为食。

10.寿命猫的寿命一般为8~14年。

(二)解剖学特点

1.成年猫体长一般40~50cm(不计尾长),雄性体重3~4kg,雌性体重2~3kg。出生时90~120g,1个月龄350~450g,2个月龄750~850g,3个月龄1100~1300g,6个月龄2300~2800g。雌猫在3月龄以内生长发育较雄猫略慢,3月龄后,差距逐渐加大。

2.猫全身骨骼包括头骨、躯干骨与四肢骨。猫有残存锁骨的痕迹,脊椎骨包括颈椎7块、胸椎13块、腰椎7块、荐椎3块、尾椎22~23块。肋骨13对,包括9对真肋、3对假肋、1对浮肋。前肢5趾,后肢4趾,爪发达而尖锐,呈三角勾形,能伸出和缩进。猫在休息和行走时爪缩进去,捕鼠时伸出来,以免在行走时发出声响,爪被磨钝。猫的趾底有脂肪质肉垫,因而行走无声,捕鼠时不会惊跑鼠。趾垫间有少量汗腺。

3.幼猫的乳齿齿式为2(I3/3,C1/1,P2/3,M0/0)=26,成年猫的齿式为2(I3/3,C1/1,P3/3,M1/1)=32,通常上颌的后假臼齿和下颌的第一真臼齿特别粗大。犬齿特别发达,尖锐如锥,适于咬死捕到的鼠类,臼齿的咀嚼面有尖锐的突起,适于把肉嚼碎;门齿不发达。口边有触须,具有感觉功能。

4.猫舌的结构是猫科动物所特有的,表面布满无数丝状的突起乳头,被有较厚的角质层,呈倒钩状,便于舔除附在骨上的肉。

5.内脏猫为单室胃,盲肠细小。其肠管长度与家兔相比,小肠1:2,盲肠1:20以上,结肠约1:8,直肠约1:1,肠壁较兔厚,具有明显的食肉动物的特征。胸腔较小,腹腔很大。盲肠细小,只能见到盲端有一个微小突起,肠壁较厚。猫的大网膜非常发达,重约35g,不但起固定保护胃、肠、脾、胰脏的作用,而且还能保温,所以猫很耐寒。肝分5叶,即左中叶、左侧叶、右中叶、右侧叶和尾叶。肺分7叶,左3叶,右4叶。雌猫有4对乳头,具双角子宫。雄猫的阴茎只是勃起时向前,而排尿时,尿向后方排出。

6.血循环系统猫的循环系统发达,血压稳定,血管壁较坚韧,对强心苷较敏感。红细胞大小不均匀,细胞边缘有一环状灰白结构,称为红细胞折射体(RE),正常情况下,10%的红细胞中有RE体。血型有A、B、AB型。

7.猫的大脑和小脑发达其头盖骨和脑的形态特征固定,对去脑实验和其他外科手术耐受力较强。此外,猫的平衡感觉、反射功能发达,瞬膜反应敏锐。

8.猫的眼睛与其他动物不同,它能按照光线的强弱灵敏地调节瞳孔,白天光线强时,瞳孔收缩直到垂直成线状,晚上光线弱时,瞳孔散大,便于在黑暗中捕食鼠类。

9.猫的听觉敏锐,外耳郭可向前、侧、后做约180°的转动,以捕捉最微弱的声音。它的听力超过人们的2倍以上,能区别距离15~21m的相似声音。